723分光光度計(jì)是利用分光光度法對物質(zhì)進(jìn)行定量定性分析的儀器。通過測定被測物質(zhì)在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)光的吸收度,對該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析。為保證測量的精密度和準(zhǔn)確度,所有儀器應(yīng)按照國家計(jì)量檢定規(guī)程規(guī)定,定期進(jìn)行校正檢定。
分光光度計(jì)采用一個(gè)可產(chǎn)生多個(gè)波長的光源,通過系列分光裝置,從而產(chǎn)生特定波長的光源,光源透過測試的樣品后,部分光源被吸收,計(jì)算樣品的吸光值,從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
分光光度計(jì)的顯色反應(yīng)一般要求影響因素選擇性好、靈敏度高,生成的有色化合物性質(zhì)穩(wěn)定,顯色劑與有色物顏色反差大,顯色反應(yīng)要易于控制顯色劑用量、反應(yīng)液的酸堿度(pH)、反應(yīng)溫度、顯色反應(yīng)時(shí)間干擾離子的影響。
顯色反應(yīng)一般要求如下:
1.選擇性好:顯色劑最好只與一種被測組分起顯色反應(yīng);
2.靈敏度高:靈敏度高有笪微量組分的測定;
3.有色化合物性質(zhì)穩(wěn)定:確保前后測定準(zhǔn)確;
4.顯色劑與有色物顏色反差大:兩者大吸收波長之差應(yīng)大于60nm;
5.顯色反應(yīng)要易于控制:結(jié)果的確保實(shí)驗(yàn)再現(xiàn)性。
影響723分光光度計(jì)顯色反應(yīng)的主要因素如下:
1.顯色劑用量:通過實(shí)驗(yàn)來確定適用量;
2.反應(yīng)液的酸堿度(pH):溶液酸堿度直接影響金屬離子與顯色劑存在形式以及有色化合物組成的穩(wěn)定性;
3.反應(yīng)溫度:不同的顯色反應(yīng)需要不同的反應(yīng)溫度,一般顯色反應(yīng)可在室溫下完成;
4.顯色反應(yīng)時(shí)間:顯色反應(yīng)的速度有快有慢;
5.干擾離子的影響:應(yīng)采用適當(dāng)方法消除其影響。